热线电话:400-990-6627
产品咨询:131-5166-7797
服务咨询:186-2622-7506
全部商品
  • 细胞系产品
    890特惠细胞株
    人类细胞系
    小鼠细胞系
    大鼠细胞系
    永生化细胞
    其他细胞系
    荧光素酶标记的细胞
    免疫细胞
  • 细胞培养试剂
    培养试剂产品
    支原体清除试剂盒
    NK细胞无血清培养试剂盒
    免疫细胞无血清培养基
    细胞胶囊试剂盒
    海星 Cas9 核酸酶Multi-NLS
    完全培养基
    340元特价培养基
    540元特价培养基
    细胞株专用完全培养基
    黑胶虫预防版细胞专培
    Luc细胞专用培养基
    通用型完全培养基
    DMEM-H完全培养基
    RPMI-1640完全培养基
    DMEM/F12完全培养基
    DMEM-L完全培养基
    MEMα完全培养基
    "黑胶虫"预防版DMEM-H完培
    "黑胶虫"预防版RPMI-1640完培
    "黑胶虫"预防版DMEM/F12完培
    "黑胶虫"预防版DMEM-L完培
    通用型基础培养基
    RPMI-1640基础培养基
    DMEM/F12基础培养基
    DMEM-H基础培养基
    DMEM-L基础培养基
    Ham's F12K基础培养基
    McCoy's 5A基础培养基
    MEMa基础培养基
    IMDM基础培养基
    冻存液产品
    无血清培养基
    添加物与染色液
  • 预筛选血清
    预筛选胎牛血清
    干细胞预筛选胎牛血清
    原代细胞预筛选胎牛血清
    病毒包装专用胎牛血清
    动物体内药效专用胎牛血清
    新生牛血清
    无外泌体胎牛血清
    特级马血清
    鸡血清
    活性炭处理胎牛血清
    无四环素胎牛血清
    透析胎牛血清
  • 干细胞产品
    间充质干细胞
    人干细胞
    小鼠干细胞
    大鼠干细胞
    其他干细胞
    干细胞培养基
    人干细胞培养基
    小鼠干细胞培养基
    大鼠干细胞培养基
    其他干细胞培养基
    干细胞分化培养基
    成骨诱导培养基
    成脂肪诱导培养基
    成软骨诱导培养基
    干细胞去外泌体专用培养基
    人干细胞去外泌体专用培养基
    小鼠干细胞去外泌体专用培养基
    大鼠干细胞去外泌体专用培养基
    其他干细胞去外泌体专用培养基
  • 原代细胞
    原代细胞完全培养基
    肿瘤相关成纤维细胞
    组织源成纤维细胞
    组织源成纤维细胞培养基
    种属
    人原代细胞
    小鼠原代细胞
    大鼠原代细胞
    兔原代细胞
    其他种属
    细胞类型Cell Types
    肾上腺皮质细胞Adrenal Cortical
    成纤维细胞Fibroblasts
    星形胶质细胞Astrocytes
    心肌细胞Cardiac Myocytes
    软骨细胞Chondrocytes
    内皮细胞Endothelial
    上皮细胞Epithelial
    毛囊细胞Hair
    肝细胞Hepatocytes
    角质细胞Keratocytes
    巨噬细胞Macrophages
    黑色素细胞Melanocytes
    脑膜细胞Meningeal
    系膜细胞Mesangial
    神经细胞Nervous
    脂肪细胞Adipose
    骨骼肌细胞Skeletal Muscle
    平滑肌细胞Smoth Muscle
    滋养层细胞Trophoblasts
    淋巴细胞Lymphocyte
    细胞系统Cell System
    心脏细胞系统Cardiac
    真皮细胞系统Dermal
    内分泌细胞系统Endocrine
    胃肠道细胞系统Gastrointestinal
    造血细胞系统Hematopoietic
    肝细胞系统Hepatic
    淋巴细胞系统Lymphatic
    神经细胞系统Nervous
    眼细胞系统Ocular
    肺细胞系统Pulmonary
    肾细胞系统Renal
    脾脏细胞系统Spleen
    脂肪细胞系统Adipose
    听觉细胞系统Auditov
    生殖细胞系统Reproductive
    口腔细胞系统Oral
    胎盘细胞系统Placenta
    骨骼细胞系统Skeletal
    骨骼肌细胞系统Skeletal Muscle
    甲状腺细胞系统Thyroid
    扁桃体细胞系统Tonsil
    尿道细胞系统Urethral
    毛囊细胞系统Hair
    心血管系统Cardiovascular
    呼吸系统Respiratory
  • 基因编辑现货细胞株
    基因敲除细胞株(现货)
    基因点突变细胞株(现货)
    基因敲入细胞株(现货)
    基因过表达稳转株(现货)
    其他基因编辑细胞株(现货)
    耐药细胞株(现货)
    基因编辑试剂盒
    CRISPR基因敲除试剂盒
    基因干扰稳转试剂盒
  • 类器官PDO
    类器官海星标准株
    类器官培养基
    类器官培养基试剂盒
  • 星享计划基因敲除细胞库
  • 基因干扰/过表达
  • 基因过表达细胞库
  • 病毒产品
    EB病毒产品
    SV40慢病毒
    EGFP慢病毒
    LUC慢病毒
    OVAL慢病毒
    hTERT慢病毒
    Cas9慢病毒
  • CRISPR文库产品
  • 服务定制
  • 分子诊断参考品
    肿瘤突变参考品
    融合基因参考品
    甲基化参考品
    甲基化gDNA参考品
    甲基化细胞沉淀参考品
基因敲除细胞系服务

Cas9-Cell Line Gene Knock-Out service(CGKO)基因敲除细胞系服务是针对各种常用的细胞系,进行基因片段敲除的技术服务。主要提供:Cas9介导的大片段基因敲除(非移码)的方式导致细胞基因功能缺失,基因敲除可以将基因功能完全消除,比RNA干扰获得的数据更加确定,没有RNA干扰残留的基因功能背景的干扰,目前越来越成为主流的基因功能研究方式。使用Cas9X可以让你轻松靶向更高分的文章!

基因敲除细胞系


使用Cas9的进行细胞系基因敲除的过程中发现:不同的位点不同的细胞系的效率差异很大,原因包括:不同的细胞株的基因拷贝数的差异很大(很多细胞系并非二倍体,而是混杂的多倍体),很多细胞的基因存在基因切割位点突变的问题(导致按照生物基因库设计的gRNA无法发挥作用),还有细胞无法获得单克隆,这些都是目前进行基因敲除的困难所在。


|   Cas9X使用新的实验模型将细胞系的敲除效率进行大幅的提升

1. 使用Cas9蛋白和gRNA的复合物直接进行电转,提高效率的同时减少非特异的切割;(目前报道脱靶率最低的方法)
2. 使用高效的电转设备,具备更高的电转效率和细胞存活率;
3. 使用更先进的单克隆稀释设备和方法,大幅提高阳性率;(提高2倍)
4. 持续建库:我们也将提供更多的标准细胞株和基因编辑细胞株产品供科研工作者选择。
5. 大片段敲除,可以通过PCR快速鉴定;
6. 非移码方式敲除,可以保证细胞系做基因回补无需考虑突变修饰的问题。
   
通过优化,Cas9X在细胞系基因敲除的效率是传统质粒法的数倍(3-5倍)结合ClonePlus技术,可以将效率提升10-15倍,也可以针对很多之前难以实现敲除的细胞株进行基因敲除操作,而且周期比病毒法更短。最快可以5周内拿到基因敲除的细胞!

|   技术原理图

基因敲除细胞系


|   技术流程图

基因敲除细胞系


|   细胞工作流程

基因敲除细胞系


|   案例分析


项目名称: 构建MARVELD1基因敲除的人鼻咽癌细胞C666-1

实验设计
种属:Human;   基因名称:MARVELD1
gRNA位点1:ATACGCTACCTAACATGGCTGGG
gRNA位点2:CCAGCATGCAAAATACAATGGGG

策略图

基因敲除细胞系

细胞信息
种属:Human       
细胞名称:人鼻咽癌细胞C666-1             
培养基:DMEM,10%FBS                                             

细胞检测                                                          
无菌检测:合格;   支原体检测:合格     
细胞克隆形成率检测:细胞增殖能力较好,但克隆团较小。
细胞基因型检测:针对gRNA打靶位置及其附近基因组序列进行测序。测序结果与理论序列一致。                                         
                                               
细胞转导                                                          
电转参数:1350V,20ms,1次;   电转体系:10 uL         

PCR筛选                                                           
筛选克隆数量:170; 杂合子数量:13; 纯合子数量:2


电泳图示例                                                     
WT:490 bp; 杂合子:490 bp; 纯合子:0 bp                                 

                 

基因敲除细胞系

基因敲除细胞系

                                         
电泳图示例

WT:0 bp; 杂合子:~218 bp; 纯合子:~218 bp

基因敲除细胞系

基因敲除细胞系

测序结果                                                           
TAAGTCCGTGGGCTTTGCTTCCTCTTGGCCCTGGGTTTGTGTCCCAG-del

3310 bp-TTTGCATGCTGGTCTCGAACTCCTGGGCTCAAGAGATCCTCC

克隆状态

基因敲除细胞系


在线表单
姓名
*
单位
*
联系方式
*
技术需求
需求描述
*
信息来源
验证码
 换一张
*
提交
购物指南
新手上路,活动相关问题
配送方式
免运费政策,合作快递
支付方式
款到发货,货到付款
售后服务
退换货流程,退换货原则
首页             现货细胞株               细胞培养基               间充质干细胞             干细胞培养基             干细胞分化诱导培养基   血清产品           细胞株基因编辑服务           分子诊断参考品定制服务            关于我们
咨询热线:400-990-6627       联系邮箱:info@hycyte.com / info@cas9x.com      联系地址:江苏省苏州市太仓市经济开发区宁波东路
所有产品均不得用于人类或动物的临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的